甾類同化激素類藥物殘留分析技術測定方法（六）

時間：2023-03-25 04:44:37來源：food欄目：食品快速檢測閱讀：

甾類同化激素類藥物殘留分析技術測定方法（六）

[db:作者] / 2022-12-13 00:00

(7)組學技術

為了能夠高效地追蹤ASs濫用情況，有必要開發新的篩選技術進行非法藥物篩查。基于轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學等“omic”技術，可以通過間接檢測其生理作用的方法來發現蛋白同化激素濫用。

Riedmaier等介紹了應用這些組學技術尋找ASs生物標志物(biomarker)及檢測其殘留的潛力。該研究組通過鑒定牛血細胞中潛在的基因表達生物標志物，監管ASs使用。采用實時定量反轉錄聚合酶聯反應(qRT-PCR)定量mRNA基因表達改變，而血液細胞是尋找生物標志物的理想材料。據報道，ASs可影響不同血細胞的mRNA基因表達。試驗選擇18頭小母牛，平均分成兩組，每組9頭。一組為空白對照組，另一組給予醋酸群勃龍和雌二醇復方制劑，連續給藥39天。采取3個點血樣檢測其mRNA表達情況，通過生物標志物圖譜篩選候選基因。結果顯示，醋酸群勃龍和雌二醇能夠顯著影響甾體類受體(ER-a和GR-a)、細胞凋亡調控元件Fas、炎性白細胞介素(IL-1a、IL-1β、IL-6)、MHCII、CK、MTPN、RBM5和β-肌動蛋白mRNA基因的表達。通過主成分分析(PCA)顯示這些基因是血液中醋酸群勃龍和雌二醇聯合使用的潛在標志物。

2011年，Anizan等采用甾體類靶向II相代謝物分析，調查分析了動物繁殖過程中天然甾體類固醇激素濫用情況。研究采用給動物外源給藥雄烯二酮，尋找潛在的生物標志物，監測甾體類固醇激素在動物體內的殘留狀況。該研究首次建立了樣品制備方法，尿液需先凍干，然后加入純水溶解，經乙酸乙酯LLE提取，SAX固相萃取柱凈化，用水和甲醇-水(25+75，v/v)進行淋洗，用0.2%甲酸甲醇和10%氨化甲醇分別進行洗脫，氮氣吹干后，甲醇-水(20+80，v/v)復溶，UPLC-MS/MS測定，結果篩選到葡萄糖醛酸本膽烷醇酮、硫酸表雄酮等代謝產物。Regal等通過HPLC-線性離子阱靜電場軌道阱組合式高分辨質譜(LTQ-Orbitrap)來獲取代謝物組學數據。血清樣品從飼養的奶牛中收集，或者從畜牧飼養不使用性激素(雌二醇-17 β或其酯苯甲酸雌二醇和孕激素)的奶牛中收集。經過適當的數據處理和多變量統計分析(OPLS-DA)，有可能突出重要的血清代謝修飾，從而管理雌二醇和孕激素的使用。這些差異被用來建立預測模型，去監控管理這些激素在牛中的非法使用。雌激素和孕激素的潛在生物標志物被指出，但還需要結構解釋和說明。

基于ASs引起的生理學變化，采用組學技術開發新的篩選方法，并用于檢測其殘留含量，這項技術將極具前景。一些非常靈敏的方法，如定量RT-PCR、質譜，能夠定量基因、蛋白表達或代謝物的細微變化，在生物信息學統計工具的幫助下，可以從實驗數據中獲取有價值的信息?？傊?，利用組學技術發現新的物質、監測畜牧業藥物濫用，將是未來的挑戰。

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